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Ficoll和Percoll的区别
时间: 2019-08-13

  percoll和淋巴细胞分离液(淋分)都是利用细胞密度不同来分离细胞的,但是percoll区分的密度梯度更多,就是如果几种细胞密度相差不多时,percoll依然能分开,可是普通的淋分就无能为力了,也可以认为,percoll分离的细胞纯度更高,

  ①Ficoll-Hypaque密度梯度离心法:人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)包括淋巴细胞和单核细胞,其体积、形状和比重与其他细胞不同,红细胞和多核白细胞比重较大,为1.092左右,而淋巴细胞和单个核细胞比重为1.075左右。利用密度在1.077±0.001g/L之间近于等渗的Ficoll-Hypaque混合溶液(称为淋巴细胞分层液)作密度梯度离心时,各种血液成分将按密度梯度重新分布聚集。血浆和血小板由于密度较低,故悬浮于分层液的上部;红细胞与粒细胞由于密度较大,故沉于分层液的底部;PBMC密度稍低于分层液,故位于分层液界面上,这样就可获得PBMC。

  ②Percoll密度梯度离心法:Percoll是Pharmacia公司的商品名,成分为硅化聚乙烯吡咯烷酮(PVP),为无毒,无刺激的新型密度梯度离心分离剂。聚乙烯吡咯酮包被的硅胶混悬液,它具有易成等渗、粘度低、无毒性、天下彩彩富网,不引起细胞聚集等优点,已得到广泛引用。由于Percoll在培养基中颗粒大小不等,其在离心过程中自然形成密度梯度,从而将不同密度的细胞分离出来。将1份10×PBS与9份percoll储存液混合,制成等渗Percoll悬液,此悬液被认为是100 % Percoll悬液,其密度为1.1294g/ml,可通过用PBS(1x)或组织培养液稀释此100%Percoll而获得适宜密度进行细胞分离,因为稀释度与密度线性相关,常用的密度如下:

  通过几个由高到低稀释度的叠加,形成与混合细胞的各组分细胞相应比重的梯度,达到可以将不同密度的细胞区分开来.


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